详细信息 | |||
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成果属性 | 国内技术二次开发 | 成果体现形式 | 新技术 |
转让范围 | 限国内转让 | 课题立项名称 | |
所处阶段 | 中期阶段 | 研究形式 | 独立研究 |
课题来源 | 成果水平 | 国内先进 | |
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本发明涉及一种乙型肝炎病毒拉米夫定耐药基因突变的实时荧光定量PCR检测方法。乙型肝炎病毒拉米夫定耐药相关突变位于DNA多聚酶基因的rtL180M、rtM204V/I突变。该方法利用PCR反应中引物在3’末端存在错配时不能正确延伸的特点,将突变位点设计在荧光定量PCR引物的3’末端,采用合适的引物浓度,Touch-down?PCR反应程序,同时结合嵌合有SyBrGreen?I染料的PCR产物的熔点曲线。根据荧光定量PCR信号和熔点曲线,即可以判断拉米夫定位点是否发生突变。该发明能准确快速地检测乙肝病毒临床标本中DNA突变,同时亦适用于其它基因的突变检测。